氨中毒在家兔肝性脑病发病中的作用

氨中毒在家兔肝性脑病发病中的作用

【实验目的】对经处理的实验动物（家兔）输入氯化氨，观察出现相应症状所需氯化氨用量及时间，探讨氨在肝性脑病发病机制中的作用；了解降低肠道PH及注射谷氨酸钠的作用。

【摘要】

目的：①复制家兔急性肝功能不全模型，用十二指肠灌注复方氯化铵法，观察氨中毒对家兔脑功能影响；②用耳缘静脉注射谷氨酸钠法治疗肝性脑病，探讨其治疗机制。

方法：建立急性肝功能不全模型；

结果：复方氯化铵可使家兔大脑功能受影响，而肝可解氨中毒，复方谷氨酸钠也可缓解其作用。

结论：肝具有解毒作用，氨中毒在肝性脑病的发生中起重要作用。

【关键词】肝性脑病，氨中毒

【实验对象】 健康家兔一只

【实验器材和药品】

1、试剂：氨基甲酸乙酯，复方氯化铵溶液，复方谷氨酸钠溶液。

2、仪器：10ml注射器、50ml注射器及针头，手术剪，镊子、止血钳、兔手术台、棉线若干、婴儿秤、缝针、导管。

【实验步骤】

1、称重：将家兔放置于婴儿称重。

2、麻醉固定：按1g/kg体重剂量兔耳缘静脉注射200g/L氨基甲酸乙酯。待兔麻醉后，将其仰卧，先后固定四肢及兔头。

3、急性肝功能不全动物模型复制：从胸骨剑突下沿腹正中线行长约8cm的切口，打开腹腔；暴露肝脏，向下压肝，剪断肝与横隔之间的镰状韧带，再将肝叶上翻，钝性分离肝胃韧带，使肝叶完全游离，辨明肝脏各叶。用粗棉线绕肝左外叶、左中叶、右中叶和方形叶根部一周并结扎，以阻断肝血流。找出十二指肠，切一小口，插入导管向下推进4~5cm，切口荷包缝合固定导管，组织钳关闭腹壁切口。

4、实验观察：

1、观察家兔注射25g/L复方氯化铵溶液后的表现。

2、记录所用复方氯化铵溶液的总量。

3、家兔出现抽搐后，给家兔按20ml/kg体重剂量自耳缘静脉缓慢注射25g/L复方谷氨酸钠溶液，并按5ml/kg体重剂量向十二指肠注入10g/L醋酸进行治疗，观察家兔的症状。

【实验结果】

1、 每隔5min向十二指肠导管中注入25g/L复方氯化铵溶液5ml，当复方氯化铵溶液累积注射到30ml时，家兔开始出现轻微抽动，当注射氯化氨溶液到达35ml时，家兔出现全身性抽搐，角弓反张的现象。

2、 自耳缘静脉缓慢注入复方谷氨酸钠溶液，并向十二指肠注入醋酸进行治疗后，家兔的全身性抽搐症状缓解。

3、 肝有对氨的解毒作用，复方谷氨酸钠溶液有缓解氨中毒的作用。

【实验讨论】

1、复方氯化铵溶液对肝性脑病的作用机理：据氨中毒学说，正常情况下，血氨的来源于清除保持动态平衡，而氨在肝中合成尿素是维持此平衡的关键。在结扎大部分肝的基础上灌注氯化铵导致血氨增高，增高的血氨可通过血脑屏障进入脑组织，通过干扰脑组织的能量代谢，使脑内神经递质发生改变，引起脑的功能障碍，出现震颤、抽搐、昏迷等类似肝性脑病症状。

（1）氨使脑内神经递质发生改变：进入脑内的氨增多，与谷氨酸结合生成谷氨酰胺，使中枢兴奋性递质谷氨酸减少，而谷氨酰胺（近似于中枢抑制性递质）增多。此外，中枢兴奋性递质乙酰胆碱减少，中枢抑制性递质GABA及其受体信号变化。因此氨的增多使脑内的神经递质平衡失调，兴奋性递质减少，而抑制性递质增多，导致中枢神经系统功能紊乱。

（2）干扰脑细胞代谢：进入脑内的氨增多，可引起一下后果：①抑制丙酮酸脱氢酶的活性，妨碍丙酮酸的氧化脱羧过程，使NADH和乙酰辅酶A生成减少，进而三羧酸循环过程停滞，可使ATP产生减少；②肝性脑病后期由于丙酮酸脱氢酶和α-酮戊二酸脱氢酶活动受抑，变现为α-酮戊二酸水平降低，三羧酸循环反应过程不能正常进行，ATP产生减少；③α-酮戊二酸经转氨基过程生成谷氨酸或与自由氨合成谷氨酸过程，消耗了大量NADH，NADH是呼吸链中完成递氢过程的重要物质，其大量消耗可使ATP产生减少；④大量的氨与谷氨酸结合生成谷氨酰胺时，消耗了大量ATP。

（3）氨对神经细胞质膜的作用：氨增高可干扰神经细胞膜Na+-K+-ATP酶活性，影响细胞内外Na+、K+分布。

2、复方谷氨酸钠溶液的作用机理：谷氨酸是中枢神经系统的一种递质 ,含量丰富 ,它在神经元间快速兴奋性突触传递和脑发育调节等

方面发挥重要作用。由结果可知，谷氨酸钠对肝性脑病有一定的治疗作用。复方谷氨酸钠溶液为氨基酸类药。谷氨酸与血中过多氨结合而成为无毒的谷氨酰胺，由尿排出，进而降低血氨。谷氨酸还可参与脑细胞的代谢，改善中枢神经系统的功能。

【参考文献】

陆源 林国华 杨午鸣 主编。机能学实验教程。第2版。北京：科学出版社，2010年