实验学案：绿叶中色素的提取和分离
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一、实验目的要求
1．进行绿叶中色素的提取和分离 2．探究绿叶中含有几种色素 二、材料用具 1．新鲜的绿叶
2．用具：干燥的定性滤纸、试管、棉塞、试管架、研钵、玻璃漏斗、尼龙布、毛细胞吸管、剪刀、药勺、量筒（10mL）、天平、铅笔、直尺 3．试剂：无水乙醇、层析液、二氧化硅和碳酸钙 三、实验步骤
（一）提取绿叶中的色素
1．原理：绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂______________中。 2．过程：
（1）取材：称取____g绿色叶片。
（2）研磨：剪碎叶片，加少许__________和__________，再加入10mL__________，迅速充分研磨（磨
成糊状）。
（3）过滤：漏斗基部放一块______________，将研磨液迅速倒入玻璃漏斗中进行过滤。
（4）收集：用小试管收集色素滤液，及时将试管口用_______塞严。 （二）分离绿叶中的色素
1．原理：各种色素在__________中的__________不同，__________高的随层析液在滤纸上扩散得_____，反之则______。因而色素就会随着_________在滤纸上的扩散而分离开。 2．过程： （1）制备滤纸条
将滤纸剪成略小于试管长与直径的滤纸条，并在一端剪去两角。 在距去角的一端1cm处用铅笔画一条细的横线。
（2）画滤液细线
用___________吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出一条____、 ______、_____的滤液细线，待滤液干后，重复画细线________次。 （3）分离绿叶中的色素
将3 mL层析液倒入烧杯中，将滤纸条（有____________的一端 朝下）略微斜靠着烧杯的内壁，轻轻地插入到层析液中，随后 用培养皿盖盖上烧坏。注意，不能让滤纸上的_________________ 触到层析液。
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滤纸条粘贴处 （4）观察实验结果
几分钟以后，取出滤纸条。此时滤纸上出现四条色素带，从上向下依次是: __________:橙黄色 叶黄素：__________ ___________：蓝绿色 叶绿素b： ________
其中，色素带最宽的是___________,最窄的是______________；扩散速度最快的是____________，最慢的是______________。 四、实验中操作注意事项及目的 实验过程 提取色素 ① ② ③ ④ 分离色素 五、练习
1.你做的色素分离实验的目的是（ ）
A.提取高等植物叶绿体中的色素 B．观察叶绿体中色素的种类
C．将提取的色素放在沉析液中分离 D．验证叶绿体中色素的种类和色素的颜色 2.研磨叶片时，加入少量CaCO 的目的是（ ）
A.保护叶绿体 B．保护叶绿素分子 C．使研磨更充分 D．保护色素分子 3.研磨叶片加丙酮的作用（ ）
A.保护色素分子B.溶解叶绿素，提取叶绿素C．加速提取色素的过程 D．溶解色素，提取色素 4.叶绿体色素的提取和分离实验中，在层析液中溶解度最小和最大的色素分别是： ①胡萝卜素 ②叶黄素 ③叶绿素a ④叶绿素b A．①和② B.②和③ C.③和④ D.④和①
5.用纸层析法分离叶绿体中的色素时，滤纸条上色素带最宽和最窄的色素名称及颜色分别是 A．叶绿素a（蓝绿色）、胡萝卜素（橙黄色）B.叶绿素a（黄绿色）、叶黄素（黄色） C.叶绿素b（黄绿色）、叶黄素（橙黄色）D.叶绿素b（蓝绿色）、胡萝卜素（黄色） 6．提取光合色素，进行纸层析分离，对该实验中各种现象的解释，正确的是 A．未见色素带，说明材料可能为黄化叶片 B.色素始终在滤纸上，是因为色素不溶于层析液 C．提取液呈绿色是由于含有叶绿素a和叶绿素b
D. 胡萝卜素处于滤纸最前方，是因为其在提取液中的溶解度最高
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注意事项 选取新鲜浓绿的叶片 研磨时加入少许的SiO2和CaCO3 研磨时加入无水乙醇 迅速、充分研磨 滤液细胞要直、细、剂 滤液细胞干燥后重得画2~3次 滤液细线不能触及层析液 操作目的 使滤液中______含量高 ________________和保护_________ 溶解叶片中的色素 防止溶剂挥发，并充分溶解色素 使分离的色素带_________________ 使分离的色素带清晰，便于观察 ① ② ③ 7．下列有关“绿叶中色素的提到和分离”实验的叙述正确的是
A．加入碳酸钙防止滤液挥发 B．用NaCl溶液提取叶片中的色素 C．用无水乙醇或丙酮分离滤液中的色素 D.加入二氧化硅（石英砂）有利于研磨充分 8．提取高等植物叶绿体中的色素是根据以下什么原理进行的？
A．纸层析法 B.各种色素在滤纸上扩散速度不同 C．叶绿体中各种色素均可溶于有机溶剂 D.各种色素在层析液中的溶解度不同 9．下列中，哪组是影响叶绿体色素分离效果的关键步骤
①选植物绿叶 ② 研磨 ③ 过滤 ④ 画滤液细线 ⑤ 层析时不要让绿叶细线触及层析液 ⑥观察色素带
A．①②④⑤ B.①②③ C.②③④ D.②③⑥
10．在圆形滤纸的中央，滴上绿叶中的色素滤液进行色素分离，可看到近似同心环状的四个色素圈，
排在最外的一个呈
A．蓝绿色 B.黄绿色 C.黄色 D.橙黄色
11．某同学在做提取叶绿体中色素的实验时，收集到的色素提取液为淡绿色。分析产生该结果的可能
原因是( )
①研磨不充分，色素未能充分提取出来②丙酮加入量太多，稀释了色素提取液 ③丙酮加得太少，色素未提取出来④未加CaCO3粉末，叶绿素分子已被破坏 A．①②④ B．①③④ C．③④ D．①② 12．叶绿素不溶于( )
A．水 B．石油醚 C．丙酮 D．苯 13．关于色素随层析液在纸条上扩散情况的错误叙述是
A．扩散速度最快的色素带呈橙黄色 B.扩散速度最慢的色素带呈蓝绿色
C．最宽的色素带是叶绿素a，呈蓝绿色 D.最后分离开的两种色素是叶绿素a和叶绿素b 14．如果没有丙酮和菠菜叶，要保证分离后色素带清晰，可以用来替代的最佳实验材料是
A．酒精和麦苗 B．酒精和大白菜 C．蒸馏水和大白菜 D．蒸馏水和麦苗 15．对“叶绿体中色素的提取和分离”实验中，下列描述正确的是( )
A．将5 g新鲜完整的菠菜叶，放入研钵中，加入无水乙醇、石英砂、CaCO3以后，迅速研磨 B．用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线处小心均匀地划出一条滤液细线，并连续迅速地重复划
2～3次
C．把划好细线的滤纸条插入层析液中，并不断摇晃，以求加快色素在滤纸条上的扩散 D．色素分子是有机物，不溶于水，所以研磨过程中加入乙醇是为了溶解色素 16．为了降低实验难度，使用纸层析法分离叶绿体中色素时， 将使用毛
细吸管在狭窄滤纸条上描绘滤液细线的方法改为在圆形滤纸中心点 样；用细棉线穿过样品中心作为层析液引流线，装置如图所示。层析 结果在滤纸上呈同心圆状分布，从外向内表示叶绿素b和叶黄素的是 A．c和d B． c和b C．d和b D．e和b 17．如图，做色素层析分离的正确装置是( )
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18．提取和分离叶绿体中色素的正确顺序应该是 ( )
A．进行纸层析一制取滤液一在滤纸条上画线一将实验材料研磨
B．制取滤液一进行纸层析一在滤纸条上画线一制取滤液一再画线 C．将实验材料剪碎，研磨一在滤纸条上画线一制取滤液一进行纸层析
D．将实验材料剪碎、研磨一制取滤液一在滤纸条上画线一进行纸层析 19．（双选题）某学生在做“叶绿体色素的提取和分离实验”时，收集到的滤液呈淡绿色，其原因可能
是
A．叶片较老较黄 B．加入的二氧化硅多了些 C．研磨不充分 D．漏斗基部塞的脱脂棉多了些 20．下面是“绿叶中色素的提取和分离”实验的部分材料和用具。据图回答：
（1）图中步骤①加入研钵内的物质为：A___________10mL，作用是_____________；B_______少许，作用是研磨充分；C__________少许，作用是___________________。
（2）图中步骤②将研磨液倒入漏斗中，漏斗基部放有_________________。定性滤纸进行干燥处理
的目的是 。 （3）图中步骤③剪去两角的作用是______________________________________，画滤液细线的要
求是_________________。
（4）图中步骤④中加盖的目的是________________________________。
21.中国的饮食讲究“色香味”，颜色会影响消费。小李同学拟研发“绿色”食用色素，他以生长很快的入侵植物水葫芦为材料进行如下实验。 I.提取叶绿素
II.探究pH对叶绿素稳定性的影响
取一些叶绿素粗产品，配成一定浓度的溶液，于室温（约25℃）下进行实验，方法和结果如下表。
注：叶绿素被破坏后变成黄褐色。 根据所学知识和实验结果，请回答：
（1）提取食用叶绿素的X应该为____________，原因是________________。 （2）表中Y应该为________，原因是_______________________。
（3）若用作食品色素，天然叶绿素色素不适用于___________食品，否则_________________。 （4）小李想了解叶绿素产品中是否含有其他色素，请你提供监测方法并写出主要步骤。
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实验：绿叶中色素的提取和分离答案
1-5：DBDDA 6-10：CDCAD 11-15：AABAD 16-18：ADD 19.AC
20.（1）无水乙醇 溶解色素 二氧化硅 碳酸钙 防止色素（叶绿素）被破坏 （2）单层尼龙布 使层析液在滤纸条上均匀扩散
（3）防止色素带扩散不整齐 细、直、齐 （4）防止层析液挥发
21.（1）对人无害的有机溶剂（食用酒精），叶绿素溶于有机溶剂和应考虑溶剂对人体的影响。
（2）8．0 ，实验中自变量的变化应有规律和应考虑碱性pH对叶绿素稳定性的影响。 （3）酸性。由于叶绿素被破坏造成食品失绿而影响品质。
（4）纸层析法，其主要步骤：①制备滤纸条；②画色素液细线 ；③用层析液分离色素；④观察色素带。
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实验四 观察植物细胞的有丝分裂
教学目的
观察植物细胞的有丝分裂过程，识别有丝分裂的不同时期 学会制作洋葱根尖有丝分裂装片的技术 学会使用高倍显微镜和绘生物图的方法 教学重点
观察植物细胞的有丝分裂过程，识别有丝分裂的不同时期
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教学难点
学会制作洋葱根尖有丝分裂装片的技术 学会使用高倍显微镜和绘生物图的方法 课时安排 1课时
教 学 过 程
一.实验前讲解 （一）实验原理
在植物体中，有丝分裂常见于根尖、茎尖等分生区细胞，高等植物细胞有丝分裂的过程，分为分裂间期和有丝分裂期的前期、中期、后期、末期。可以用高倍镜观察植物细胞的有丝分裂的过程，根据各个时期细胞内染色体的变化情况，识别细胞处于有丝分裂的哪一个时期。细胞核内的染色体容易被碱性染料染色。 （二）材料用具 略
（三）方法步骤 1．洋葱根尖的培养 2．装片的制作
（1）解离：剪取数条2mm~3mm的洋葱根尖，立即放入盛有氯化氢的质量分数为15％的溶液和酒精的体积分数为95％溶液的混合液（1：1）的玻璃皿中，在室温下解离3～5mjn后取出很尖。
注意：解离充分是实验成功的必备条件；解离的目的用药液溶解细胞间质，使组织细胞分开。
（2）漂洗：待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10 min
注意：漂洗的目的是洗去根中多余的解离液，如果不把多余的解离液洗去，一方面会影响效果，另一方面碱性的染料会腐蚀显微镜的镜头。
（3）染色：把洋葱根尖放进盛有龙胆紫的质量浓度为0.01g/ml或0.02g/ml的溶液（或醋酸洋）的玻璃皿中，染色3－5 min。
注意：本实验观察的重点是染色体、染色质，而色体、染色质都容易被碱性染料染成深色，
（4）制片:用镊子将染好色的洋葱根尖取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并且用镊子尖把洋葱根尖弄碎．盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后，用拇指轻轻地五载破对，这样可以使细胞分散开来。
3．洋葱根尖细胞有丝分裂的观察 1．低倍镜
把制作成的洋葱根尖装片先放在低倍镜下观察，慢慢移动装片，要求找到分生区细胞，它的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。 2．高倍镜观察
找到分生区细胞后，换上高倍镜，用细准点螺旋和反光镜把视野调整清晰，直到看清细胞物象为止。
3．仔细观察，可先找出处于细胞分裂期中期的细胞，然后再找出前期、后期、末期的细胞。注
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察。
意观察各个时期细胞内染色体变化的特点。
4．在一个视野里，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。如果是这样，可以慢慢地移动装片，从邻近的分生细胞中寻找。 二.学生实验并指导 三.总结
有丝分裂图像识别原则：
①染色体加倍——有丝分裂后期；
②所有染色体着丝点排在赤道板上——有丝分裂中期； ③子细胞中染色体数目同母组胞——有丝分裂末期。 四.作业布置： 完成实验报告
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