首页 热点资讯 义务教育 高等教育 出国留学 考研考公
您的当前位置:首页正文

复合菌株发酵中药复方对鸡柔嫩艾美尔球虫病的疗效研究

2023-11-07 来源:华拓网
复合菌株发酵中药复方对鸡柔嫩艾美尔球虫病的疗效研究

鸡球虫病是造成现代养禽业经济损失最大的 寄生虫病之一(索勋等,1998),严重危害着鸡类的 健康,发病率达 30%~100%,死亡率达 20%~80% (王米等,2003),本病分布广,感染率高,常发生在 15~50 日龄的雏鸡,几乎养鸡的地方都有球虫存 在。每年全世界因球虫病造成的损失就高达 20 亿 美元,我国每年用于抗球虫药的费用高达 6~18 亿 元。就目前来说,对该病的控制主要有药物防治和 疫苗接种两种手段,但化学药物由于耐药性和球虫 疫苗价格昂贵等缺点,不易推广(刘宏等,2010)。目 前,国内外对球虫疫苗的研究有了一定进展,但仍 存在诸多问题,短期内还难以推广应用,化学药物 由于易残留,毒副作用大等缺点也不易常时间应 用。中草药在我国资源丰富,有关中草药驱杀寄生 虫的功用,早在我国古代的医学论著中就有记载。 中草药不仅能直接杀灭病原体,而且能调节机体免 疫功能,对防治球虫病是行之有效的疗法(葛凯等, 2009)。近年来又有报道发现,中草药经过发酵后, 除上述优点外,还可提高药效,提速疗效。本试验旨 在筛选最佳中药方剂及最佳发酵有益菌种的基础 上,发酵中药复方,探明复合菌株发酵中药对肉鸡 柔嫩艾美尔球虫病的防治效果,进而研制出有效防 治鸡球虫病的中药制剂,为替代化学药物的应用防 治鸡球虫病将开辟一条新途径,对我国养鸡业的健 康可持续发展具有十分重要的意义。 1 材料与方法

1.1 试验药物与虫株、菌株 1.1.1 试验药物

通过前期试验筛选出马鞭草、黄柏等设计组成 了一个中草药复方,研磨粉碎后按比例混合,过

200 目筛,供试验用。西药:地克珠利,购于泰安市 上高兽医防疫站。 1.1.2 试验虫株

试验前期已保存的柔嫩艾美耳球虫卵囊经复 壮后计数后,接种备用。 1.1.3 试验菌株

酵母菌:产朊假丝酵母; 乳酸菌:6133、7340 ; 芽孢菌:纳豆。

上述三类菌株均由山东宝来利来生物工程股 份有限公司生物研究院分离得到。

1.2 试验动物与分组

将 240 只 13 日龄健康的肉雏鸡随机分成 8

组,每组 3 个重复,每重复 10 只鸡,称重计算并记

[摘要] 探讨复合菌株发酵中药复方防治鸡球虫病的研究。将 240 只肉鸡分成 8 组,分别为不感染不给药组、感染不给药

组、西药组、中药复方组、酵母乳酸发酵组、酵母芽孢发酵组、乳酸芽孢发酵组、酵母乳酸芽孢发酵组。依据抗球虫指数对各给

药组治疗鸡柔嫩艾美尔球虫病的效果进行评价。结果表明,酵母乳酸发酵组存活率为 90%,ACI 为 102.6,西药组存活率为

60%,ACI 为 115.2。由此可知,酵母乳酸发酵组防治鸡球虫效果优于其余各给药组,略低于西药组。

[关键词]复合菌株发酵;中药复方;柔嫩艾美尔球虫;抗球虫指数 广东饲料 第 22 卷第 10 期 2013 年 10 月 试 验 研 究 · 24·表 1 试验分组

组别 处理 成分 给药方式及给药量 Ⅰ 不感染不给药组 不给药 Ⅱ 感染不给药组 不给药

Ⅲ 西药组 地克珠利 灌胃,0.1 mL·只 -1 ·天 -1

Ⅳ 中药复方组 马鞭草、黄柏等 灌胃,3 mL·只 -1 ·天 -1

Ⅴ 酵母乳酸发酵组 马鞭草、黄柏等 灌胃,3 mL·只 -1 ·天 -1

Ⅵ 酵母芽孢发酵组 马鞭草、黄柏等 灌胃,3 mL·只 -1 ·天 -1

Ⅶ 乳酸芽孢发酵组 马鞭草、黄柏等 灌胃,3 mL·只 -1 ·天 -1

Ⅷ 酵母乳酸芽孢发酵组 马鞭草、黄柏等 灌胃,3 mL·只 -1 ·天 -1

表 2 基础日粮配方及营养水平

日粮组成 百分比 /% 营养水平 /% 玉米 56.6 代谢能 ME/(MJ/kg) 12.06

豆粕 36.0 粗蛋白 21.6 豆油 3.0 钙 0.98

磷酸氢钙 1.8 总磷 0.68 石粉 1.3 有效磷 0.49 食盐 0.3 蛋氨酸 0.47

预混料 1.0 蛋+胱氨酸 0.78 合计 100 赖氨酸 1.15

注:①预混料可为每千克全价料提供:Mn 75 mg;Zn 75 mg,Fe 95 mg,Cu 10 mg,I 0.6

mg,Se 0.3 mg,VA 10000 IU,VD 3

2750 IU,VE 20 mg,VK 3

2 mg,VB 1

1.8 mg,VB 2

6 mg,泛

酸 12 mg,烟酸 66 mg,VB 6

4.5 mg,叶酸;1mg,VB 12

0.01 mg,生物素 0.15 mg,胆碱 1000 mg。②营养水平为计算值。

录初始平均体重,分组后各处理给药组分别用相应 的药物进行治疗,直至试验结束,地克株利给药量 为 0.1 mL·只 -1 ·天 -1

,饮水。中药组为 3mL·只 -1 ·天 -1

,相当于用药为 1.5 g·只 -1 ·天 -1

,饮水,连用 9 d。

具体试验分组及给药方法见表 1 。 1.3 试验用饲料

试验所用饮水器、料盘等均在 80℃干燥箱中

烘烤 0.5 h 以上,以确保外界环境无球虫。试验用基 础日粮组成及营养水平见表 2,未添加任何抗生素

和抗球虫药。 1.4 卵囊感染量

试验鸡于 14 日龄攻球虫卵囊,除不感染不给 药组外,其它处理组鸡只每只鸡接种 1.5×10 5 个卵

囊。感染后第 8 d 剖杀全部雏鸡,进行盲肠病变计 分和卵囊计数。接种后每天观察记录各组鸡的临床 表现,发病死亡情况、观察排泄物并进行粪便计分。 在试验过程中死亡鸡只进行剖检,观察病变是否死 于球虫病,并进行肠内容物检查球虫卵囊计数。 2 中药对鸡球虫病治疗试验疗效评价指标 2.1 临床症状

临床观察感染卵囊后逐日观察并记录各组鸡

的精神、食欲、粪便变化和死亡情况,并对死亡鸡随 时进行剖检记录。 2.2 增重情况

于感染后第 0 d、8 d 早晨逐只空腹称重,记录 并计算各组的平均增重。 2.3 疗效评价指标

病变和卵囊数观察:试验结束称重后,各组鸡 全部扑杀,观察内脏病变,摘取盲 肠,刮取粪便检查球虫卵囊数,冲洗 盲肠,检查病变情况,记录病变和病 变值。

2.3.1 粪便记分:0 分,正常;1

分,有少量血便;2 分,中等量血便;3 分,有许多血便;4 分,无正常粪便。 2.3.2 病变记分和病变值:0 分, 肠道中无眼观异常;1 分,肠道充血 或增厚;2 分,肠道增厚,有少量出血 和渗出;3 分,肠道弥漫性出血;4 分,肠道严重出血或有肠芯。 病变值=每组鸡肠道平均病变 记分×10

2.3.3 卵囊值(OPG 值):OPG 值即每克粪便中 的卵囊值数(柔嫩×10 6 )

当 OPG 值为 0~0.1 时,卵囊值为 0;当 OPG 值为 0.1~1.0,卵囊值为 1;

当 OPG 值为 2.0~5.0 时,卵囊值为 10;当 OPG 值为 6.0~10.0 时,卵囊值为 20 当 OPG 值为≥11.0 时,卵囊值为 40;

2.3.4 成活率

广东饲料 第 22 卷第 10 期 2013 年 10 月 试 验 研 究 · 25·表 3 血便值

组别 处理 5 d 6 d 7 d 平均血便计分 Ⅰ 不感染不给药组 0 0 0 0 Ⅱ 感染不给药组 0 3 2 1.667 Ⅲ 西药组 0 0 1 0.333 Ⅳ 中药复方组 0 2 1 1

Ⅴ 酵母乳酸发酵组 0 1 1 0.667 Ⅵ 酵母芽孢发酵组 0 2 1 1

Ⅶ 乳酸芽孢发酵组 0 3 1 1.333

Ⅷ 酵母乳酸芽孢发酵组 0 3 2 1.667 注:表中数字表示每 d 每羽血便计分 表 4 各组试验鸡疗效评价指标

组别 处理 相对增重率 /% 存活率 /% 病变值 卵囊值 ACI Ⅰ 不感染不给药组 100.0 100 0 0 200.0 Ⅱ 感染不给药组 54.2 60 26 40 48.2 Ⅲ 西药组 80.2 90 15 40 115.2 Ⅳ 中药复方组 76.3 70 28 40 78.3

Ⅴ 酵母乳酸发酵组 70.6 90 18 40 102.6 Ⅵ 酵母芽孢发酵组 70.7 80 24 40 86.7 Ⅶ 乳酸芽孢发酵组 56.3 60 22 40 54.3

Ⅷ 酵母乳酸芽孢发酵组 65.4 40 38 40 27.4 成活率(%)=(各组成活鸡数÷各组试验鸡 数)×100% 2.3.5 增重率

增重率(%)=(试验结束后平均体重-试验开 始平均体重)÷试验开始平均体重×100%

相对增重率(%)=(用药组或感染不用药组的 增重率÷不感染不用药组的增重率) ×100% 2.3.6 抗球虫指数(ACI)

抗球虫指数(ACI)=(成活率+相对增重率) -(病变值+卵囊值)

根据 ACI 来判定药物的抗球虫疗效。ACI≥

180 者,判定为高效抗球虫药;ACI 为 160~180 者, 判定为中效抗球虫药;ACI 为 120~160 者,判定为 低效抗球虫药;ACI<120 者,判为无效抗球虫药。 3 结果分析 3.1 临床症状

感染球虫孢子化卵囊后第 5 d,各攻球虫组为

未出现血便现象,鸡只表现为精神萎靡、食欲减退、 羽毛松乱、翅膀下垂,缩颈闭眼等症状。第 6 d,除不 感染不给药和西药组未曾出现血便外,其余各组都 出现大量血便,用药组第 7 d,血便有所减轻,鸡群

食欲正常,不感染不给药组无血便,鸡只采食正常, 精神状态良好。 3.2 血便值

血便计分是一个评判球虫病发生及发病程度

的指标,由表 3 血便计分来看,酵母乳酸发酵中药 复方组的血便明显低于酵母乳酸发酵组、酵母芽孢 发酵组、酵母乳酸芽孢发酵组、中药组、感染不给药 组,略高于西药地克珠利组,说明用药效果明显,酵 母乳酸发酵效果好于为发酵中药复方组。

3.3 存活率、卵囊值、病变值、相对增重率和药 物抗球虫效果

详见表 4。感染不给药组的相对增重率和存活

率远低于给药各组,酵母乳酸发酵组存活率和相对 增重率与西药组差别不大,病变值较低,卵囊值较 低。说明酵母乳酸发酵中药和西药组,抗球虫效果 良好。

ACI 是一个综合评价抗球虫药物疗效的重要

指标,根据判断标准可知,各组鸡只抗球虫效果普 遍不好(西药组 ACI 仅为 115.2)。由于鸡只攻毒剂 量较高,达到每只鸡接种 1.5×10 5

个卵囊,导致感

染不给药组死亡率较高达 60%,这也直接导致球虫

广东饲料 第 22 卷第 10 期 2013 年 10 月 试 验 研 究 · 26·模型的建立不太好。但从抗球虫指数的大小来看, 酵母乳酸发酵组 ACI 为 102.6,略低于西药组,远远 高于中药组、酵母芽孢发酵、乳酸芽孢发酵、酵母乳 酸芽孢发酵和感染不给药等组。 4 讨论

4.1 从试验结果可以看出,感染不给药组的死

亡率高达 40%,盲肠病变值为 26,OPG 值为 40,表 明本试验用的球虫卵囊具有超强毒力,可能与肉鸡 卵囊接种量过大(1.5×10 5

个卵囊)有关。鸡球虫寄

生于肠道上皮细胞,在肠道内繁殖,破坏肠粘膜的 完整性,引发粘膜上皮细胞崩解,使肠道内离子和 渗透压失去平衡,营养物质不能吸收,且大量出血, 肠粘膜的完整性被破坏,继发感染,临床上发病鸡 表现为精神沉郁、下痢、贫血等症状,甚至死亡(晋 友兰等,2010;蒋金书等,1985)。

4.2 本试验结果表明,地克珠利具有很好的抗 球虫,这与有关文献报道结果基本一致。地克珠利 是一种光谱的高效抗球虫药,主要作用于球虫裂殖

子,几乎能完全抑制鸡球虫卵囊的产生(王巧静等, 2007),这在本研究中也得到了很好的体现,在同等 浓度接种球虫的情况下,抗球虫指数达到 115.2,显 著高于其余各给药组。

4.3 本试验结果表明中药复方经酵母乳酸菌发 酵后,对肉鸡艾美尔球虫病具有很好的疗效。方剂 中的马鞭草活血散瘀,截疟,解毒,利水消肿,对球 虫有抑虫、杀虫作用。研究报道,以马鞭草和白头翁 为主要成分的中药复方制剂,抗球虫效果明显,在 饲料中添加一定量的上述中药方剂,预防柔嫩艾美 耳球虫其抗球虫指数(ACI)在 135~197 之间,抗球 虫效果明显(薛飞群等,2003)。黄柏、清热、燥湿、泻 火、解毒、治热痢,也可抑杀球虫,凉血缓解临床症 状等。有学者研究中药球康对鸡球虫病的防治及作 用机理的研究,发现由马鞭草、黄柏等制成的中药 超微粉 2%拌料给药组和 1%拌料给药组抗球虫指 数分别为 175.96 和 166.89,具有很好抗球虫效果 (周作勇等,2009),而且中药复方(马鞭草、黄柏、郁 金等)通过破坏虫体结构的完整性,抑制虫体物质 代谢及能量代谢等,从而杀死或抑制球虫的生长和 繁殖(周作勇等,2006)。中草药防治鸡球虫病多从 杀虫、抑虫,增强机体免疫力,缓解临床症状三方面 来发挥作用(张文香等,2005;樊福好等,2002;颜卉 等,2005)。本试验方剂很好的从上述三方面入手进 行球虫病的防治,试验结果显示酵母乳酸菌发酵中 药复方抗球虫效果较好(ACI 达到 102.6),略低于 西药组(ACI 为 115.2)。且酵母乳酸发酵复方无论 从血便、相对增重率,还是卵囊值等,都显示出了较 好的疗效,倘若攻毒剂量降低,估计试验效果会更 好,发酵中草药还是显示出了较好的应用前景。 5 结论

中草药复方(马鞭草、黄柏等)经复合菌株乳酸 菌、酵母菌发酵后,给药攻毒柔嫩艾美尔球虫病的 肉鸡,抗球虫效果良好,ACI 达到 102.6,略低于西 药组(115.2),且发酵组鸡只存活率达到 90%,远高 于西药组的 60%,有必要降低攻毒浓度试验,更好 的观察其疗效。 参考文献:

[1] 樊福好,谢明权,林辉环. 免疫调节剂对球虫感染鸡 的免疫学指标的影响[J].中国兽医杂志,2002,39(3):11~14. [2] 葛凯,李培英,汪兴生. 中草药复方制剂对柔嫩艾美

耳球虫感染鸡血液生化指标的影响[J].畜牧与兽医,2009,41 (6):74~78.

[3] 蒋金书,林昆华. 畜禽寄生虫病[M].北京:农业出版

社,1985,181~182.

[4] 晋爱兰,张供领,万双秀,蒋培红.中草药对肉鸡球虫病 临床病例的疗效研究[J].中国畜牧兽医,2010,3(7):208~209. [5] 刘宏,毛世香,李社成,等. 中草药防治鸡球虫病的 研究[J].上海畜牧兽医通讯,2010,4:52~53.

[6 史福胜.中草药中草药防治鸡球虫病应用研究的现状 [J].中兽医学杂志,1997,3:41~42.

[7] 索勋,李国清. 鸡球虫病学[M]. 北京:中国农业大学 出版社,1998:307~309.

[8] 王米,金岒梅.中草药饲料添加剂在抗鸡球虫病上的 应用[J].中国饲料,2003(2):29~30.

[9] 王巧静,杜爱芳. 中草药制剂防制鸡柔嫩艾美尔球虫 病的效果研究[J].浙江畜牧兽医,2007,(6):1~4. [10] 薛飞群,费陈忠,赵其平,等. 中药抗球虫制剂

TF-103 的亚慢性毒性试验[J].中国兽医科学,2003,33(5): 43~46.

[11] 颜卉,郗伟斌,杜绍范,等. 中药复方制剂抗鸡球虫 效果的研究[J].黑龙江畜牧兽医,2005(6):68~69. [12] 张文香,张香斋,李佩国,等.中草药对球虫卵囊孢 子化的影响[J].河北科技师范学院学报,2005,19(2):23~25. [13] 周作勇. 中药“球康”对鸡球虫病的防治及作用机 理的研究[D].中国重庆:西南大学,2006.

[14] 周作勇,王芝英,聂奎. 中药“球康”对柔嫩艾美球虫 超微结构的影响 [J]. 中国兽医科学,2009,39(12):1120~ 1123.

广东饲料 第 22 卷第 10 期 2013 年 10 月 试 验 研 究 · 27·

因篇幅问题不能全部显示,请点此查看更多更全内容