安阳工学院学报
JournalofAnyangInstituteofTechnologyVol.19No.2(Gen.No.104)
Mar,2020
DOI:10.19329/j.cnki.1673-2928.2020.02.026黄芪多糖对动物免疫器官生长发育的影响
马发顺1,2,范乐乐1,时志琪1,梁秀丽1,2,宋玉伟1,2,元雪浈3*
(1.安阳工学院生物与食品工程学院,河南安阳455000;2.河南省兽用生物制品研发与应用国际联合实
验室/河南省动物疫病防控与营养免疫院士工作站,河南安阳455000;3.河南省兽药饲料监察所,郑州
450000)
摘要:为了了解黄芪多糖对动物免疫器官的作用,以64只昆明鼠为试验动物,按照《中国兽药典2015版(二部)》提供的方法对4种黄芪多糖样品进行检测,每个样品分别设置试验组和对照组,试验期7d;试验结束后将小鼠处死,称量其体重、脾重和胸腺重,并计算脾指数和胸腺指数,对试验组和对照组间的差异进行显著性检验。结果表明:脾重和脾指数试验组均极显著高于对照组(P<0.01),胸腺重显著高于对照组(P<0.05),体重和胸腺指数均差异不显著(P>0.05);试验组与对照组相比脾重增长率为71.98%,胸腺重增长率为25.93%,体重增长率为5.67%;试验组脾重和胸腺重变异程度缩小而体重变异程度增大。此结果可为黄芪多糖的作用机理研究提供参考。
关键词:黄芪多糖;昆明鼠;免疫器官;脾指数;胸腺指数中图分类号:S816.4
文献标志码:A
文章编号:1673-2928(2020)02-0100-04
中药黄芪为蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根,其中最主要的活性成分是多糖、皂甙、黄酮等[1]。黄芪多糖(APS)具有促进动物免疫器官发育、提高机体免疫力、促进生长发育等功能,是较好的免疫调节剂。杨庆芳等[2]、柳志余等[3]和孙波等[4]研究表明,肉鸡和珍珠鸡日粮中添加APS可提高日增重和免疫器官功能;蒙洪娇等[5]和李春凤等[6]研究表明,APS可提高仔猪日增重和免疫功能;桑秋凌等[7]认为APS可增强大鼠细胞免疫功能;蒋瑞雪等[8]研究了APS对小鼠免疫功能的影响;葛斌等[9]研究了APS对小鼠的抗衰老作用机制。上述研究主要集中在APS对动物的生产性能和免疫功能方面,而针对动物免疫器官生长发育的研究比较少。笔者以昆明鼠为试验动物,在APS生物活性检测的基础上研究其对小鼠免疫器官的影响,为以后APS的作用机理研究提供参考。1材料与方法1.1材料
1.1.1试验动物
昆明小鼠(SPF级)购自河南省实验动物中心。饲养室保持空气流通,自然光照,温度控制在20~26℃,湿度控制在40%~70%;所用饲料(SPF
收稿日期:2019-11-28
级),购自河南省实验动物中心;饮水为去离子水;
保持小鼠生活环境清新,保持饲料、饮水清洁。1.1.2试验仪器和药品
电子天平(型号ES3200),天津市德安特传感技术有限公司生产;独立送风隔离笼具(型号IVC-II),上海康为医疗科技发展有限公司生产;黄芪多糖注射液(规格以葡萄糖计100mL:1.0g),河南省各兽药厂提供;氯化钠注射液(规格0.90%),河南科伦药业有限公司生产。1.2方法
1.2.1试验设计
取体重18~20g健康昆明鼠64只,随机分为8组,每组8只;其中4组为试验组,4组为对照组。安排4种APS样品进行试验,每1种样品设1组试验,1组对照。试验组每只腹腔注射黄芪多糖注射液0.5mL/d,对照组注射等量生理盐水;试验期为7d。1.2.2测定项目
最后1次注射APS24h后将小鼠处死,称量小鼠的体重、脾重和胸腺重,并计算脾指数和胸腺指数;脾指数=脾脏重(mg)/体重(g),胸腺指数=胸腺重(mg)/体重(g)。再计算试验组相对于对照组的增长率:增长率=(试验组测量值-对照组测量值)/对照
基金项目:国家重点研发计划项目(2017YFD0501000)。
作者简介:马发顺(1963-)男,河南长垣人,安阳工学院生物与食品工程学院教授,主要研究方向:动物遗传育种和动物疾
病控制。
通讯作者:元雪浈(1987-)女,河南淇县人,硕士,河南省兽药饲料监察所助理兽医师,主要从事兽药产品动物实验和微生物
检验工作。
第二期
马发顺,范乐乐,时志琪,等:黄芪多糖对动物免疫器官生长发育的影响
101组测量值×100%。按照《中华人民共和国兽药典》
(2015版二部)的规定,试验组与对照组脾指数差值≥2判定样品为合格,差值<2判定样品为不合格。
1.2.3数据分析
使用Excel2010软件进行数据整理和描述统
样品S1S2S3S4
体重/gxˉ±s
计,试验组与对照组间的比较采用t检验法,数据
以“平均数±标准差”表示。2结果与分析
2.1各项目初步统计结果
APS生物活性检测各项目测定结果见表1。从表1可以看出,脾重和脾指数在4种样品试
胸腺重/mgxˉ±s
表1各项目测定结果
组别试验对照试验对照试验对照试验对照
n88888888
脾重/mg
CV/%10.93.428.297.0013.6411.529.82
xˉ±s
脾指数xˉ±s
胸腺指数xˉ±s
CV/%4.934.413.945.052.727.135.379.45
CV/%15.5722.4329.4422.216.0817.1237.97
CV/%7.35.7910.863.5213.496.0811.9310.84
CV/%16.2122.2827.9922.6523.1913.6431.5632.46
28.40±3.1026.18±0.9023.84B±1.9827.01A±1.8929.66a±4.0524.33b±2.8024.41B±2.40
149.3A±7.458.9±2.6
B
114.9±17.999.9±22.476.1a±22.452.2b±11.6146.3a±23.5115.8b±19.875.9B±28.8
5.30A±0.392.25±0.13
B
4.07±0.663.81±0.853.20A±0.901.94B±0.445.05±1.174.76±0.654.83a±1.523.06b±0.99
193.8A±7.6142.0B±7.2190.5A±5.2109.4B±7.8130.0A±7.072.1B±6.8
8.19A±0.895.27B±0.196.54A±0.884.52B±0.284.43A±0.532.97B±0.32
29.71A±3.3011.11140.1A±36.425.96
注:同一样品试验组与对照组间数据肩标大写字母不同表示差异极显著(P<0.01),小写字母不同表示差异显著(P<
0.05),无字母肩标表示差异不显著(P>0.05)
验组与对照组间均差异极显著(P<0.01),胸腺重1种样品差异极显著(P<0.01)、2种样品差异显著(P<0.05);胸腺指数1种样品差异极显著(P<0.01)、1种样品差异显著(P<0.05);体重2种样品差异极显著(P<0.01)、1种样品差异显著(P<0.05),但样品S2t值为负值。从变异系数(CV)来看,胸腺重和胸
样品S1S2S3S4
指标
差值增长率/%差值增长率/%差值增长率/%差值增长率/%
腺指数变异程度较大,其次是体重,脾重和脾指数变异程度最小。2.2各项目增长情况
比较各项目试验组相对于对照组的增长情况,计算的绝对差值和增长率见表2。
表2各项目试验组相对于对照组的增长情况
体重/g脾重/mg胸腺重/mg脾指数2.2290.4415.053.058.49153.6415.07135.31-3.1651.8023.892.93-11.7136.4745.7755.525.3381.0930.532.0121.9274.1426.3644.525.3057.8664.211.4621.6980.2384.5949.14
胸腺指数
0.266.791.2765.330.296.131.7757.85
从表2可以看出,体重项差值大小顺序为:S3、S4、S1、S2,脾重项为:S1、S3、S4、S2,胸腺重项为:S4、S3、S2、S1,脾指数项为:S1、S2、S3、S4,胸腺指数项为:S4、S2、S3、S1。从各项目增长率的比较来看,样品S1和S3的脾重增长率均最大,样品S4的胸腺重最大,样品S2的胸腺指数最大。样品S2的体重项试验组小于对照组。根据判定标准可判定样品S1、S2、S3为合格品,样品S4不合格。
2.3合格样品试验组与对照组的比较
将合格样品S1、S2、S3进行综合分析,考查各项目试验组相对于对照组的变化情况,结果见表3。
从表3可以看出,试验组体重高于对照组体重5.67个百分点,但差异不显著(P>0.05),试验组变异
程度大于对照组;脾重试验组比对照组高71.98个百分点,差异极显著(P<0.01),试验组变异程度小于对照组;胸腺重试验组比对照组高25.93个百分点,差异显著(P<0.05),试验组变异程度小于对照组;脾指数试验组比对照组高66.33个百分点,差异极显著(P<0.01),试验组变异程度小于对照组;胸腺指数试验组比对照组高17.29个百分点,但差异不显著(P>0.05),试验组变异程度小于对照组。3讨论与结论
1)从试验组与对照组的比较来看,APS对小鼠脾脏和胸腺生长均有促进作用,但对脾脏生长的
102n
安阳工学院学报
表3合格样品试验组与对照组间的比较
项目体重/g脾重/mg胸腺重/mg脾指数胸腺指数
组别试验组对照组试验组对照组试验组对照组试验组对照组试验组对照组
24242424242424242424
±s27.30±4.0325.84±2.31177.87A±21.36103.43B±34.79112.44a±35.8389.28b±32.766.68A±1.414.01B±1.304.11±1.203.50±1.35
CV/%14.748.9312.0133.6431.8736.6921.0932.3729.2038.49
差值1.4674.4423.152.660.61
增长率/%5.6771.9825.9366.3317.29
2020年
注:同一项目试验组与对照组间比较,同列数据肩标大写字母不同表示差异极显著(P<0.01),小写字母不同表示差异显著(P<0.05),无字母肩标表示差异不显著(P>0.05)
促进作用更显著,此结果与陈明志等[10]和高旭等[11]
的研究结果一致。注射APS注射液可使小鼠脾重和脾指数极显著提高(P<0.01),可使胸腺重显著提高(P<0.05),而胸腺指数提高未达到显著水平(P>0.05),这与黄志远等[12]的研究结果不完全相同。APS对体重生长的影响不显著(P>0.05),此结果与杨庆芳等[2]、柳志余等[3]和孙波等[4]的结论不一致,这可能与动物的种类及试验设计有关。样品S2体重项的特殊差异可能是由于试验应激和误差所造成。
2)APS对小鼠体重、脾重和胸腺重促生长作用程度不同。比较而言对脾重影响最大(增长率71.98%),其次是胸腺重(增重率25.93%),对体重影响最小(增长率5.67%)。由于APS样品不同其生物学效价不同,对小鼠脾重、胸腺重和体重的影响有较大差异;小鼠个体对APS样品的反应不同,导致试验组体重变异程度有增大的倾向,而由于APS对免疫器官的促生长作用,使脾重和胸腺重的变异程度有减小的倾向。
3)按照我国兽药典提供的方法进行APS生物活性检测,方法中仅规定了小鼠的体重要求,而没有日龄、性别、注射操作、体重称量、脾脏分离与称量等方面的说明。在实际检测时这些因素均可能成为误差来源,影响试验数据的精确性和准确性。所以相关部门应加强试验规范性研究,出台操作细则以降低试验误差,提高试验结果的可靠性。参考文献:
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第二期
马发顺,范乐乐,时志琪,等:黄芪多糖对动物免疫器官生长发育的影响
103EffectsofAstragalusPolysaccharideontheGrowthandDevelopmentofAnimal
ImmuneOrgans
(1.ShoolofBiotechnologyandFoodScience,AnyangInstituteofTechnology,Anyang455000,China;2.HenanJointInternationalResearchLaboratoryofVeterinaryBiologicsResearchandApplication,AnyangInstituteofTechnology/AcademicianWorkstationofAnimalDiseaseControlandNutritionImmunityinHenanProvince,Anyang455000,China;3.
HenanProvinceAnimalDrugFeedInspectionOffice,Zhengzhou450000,China)
MAFashun1,2,FANLele1,SHIZhiqi1,LIANGXiuli1,2,SHONGYuwen1,2,YUANXuexue3*
Abstract:InordertounderstandtheeffectofAstragalusPolysaccharidesonimmuneorgansofanimals,64Kun⁃
mingmicewereusedasexperimentalanimals.FoursamplesofAstragaluspolysaccharidesweretestedaccordingtothemethodsprovidedbytheChineseVeterinaryPharmacopoeia2015(PartII).Eachsamplewasdividedintoexperimentalgroupandcontrolgroupfor7days.Attheendoftheexperiment,micewereexecutedtoweightheirbodyweight,spleenweightandthymusweight,andspleenindexandthymusindexwerecalculated.Thediffer⁃encebetweentheexperimentalgroupandthecontrolgroupwastested.Theresultsshowedthatthespleenweightandspleenindexoftheexperimentalgroupweresignificantlyhigherthanthoseofthecontrolgroup(P<0.01),thethymusweightwassignificantlyhigherthanthatofthecontrolgroup(P<0.05),andtherewasnosignificantdifferenceinbodyweightandthymusindex(P>0.05).Comparedwiththecontrolgroup,thegrowthrateofspleenweightwas71.98%,thymusweightwas25.93%,andbodyweightwas5.67%.Thevariationdegreeofspleenweightandthymusweightdecreasedwhilethatofbodyweightincreasedintheexperimentalgroup.TheresultscanprovideareferenceforthestudyofthemechanismofAstragaluspolysaccharides.
Keywords:Astragaluspolysaccharide;Kunmingmice;immuneorgans;spleenindex;thymusindex
(责任编辑:王彦永)
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的协同监管,创新制度,健全体制,落实主体责任,
加大社会监督,注重建筑安全隐患排查和重大风险防控,坚守发展决不能以牺牲安全为代价这条不可逾越的红线,提升我国建筑安全监管整体水平,推进我国建筑行业持续健康发展。参考文献:
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(责任编辑:郝安林)
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